Technologies
dPCR – PCR digitale
Oncologie
La PCR digitale est une technologie innovante dans le domaine de la biologie moléculaire. Cette technique permet de séparer et amplifier individuellement chaque molécule d’ADN.
La partition réactionnelle possède de nombreux avantages : – la réduction des inhibiteurs d’amplification, en particulier sur échantillons FFPE – un multiplexage sans biais de compétition – une quantification absolue – une sensibilité jusqu’à 0,01 % (Reita et al. Cancers 2021; 13 (19):4926)
Principales caractéristiques
Sensibilité accrue
Haute capacité de multiplexage
Précision et spécificité
Tolérance aux inhibiteurs
Exemples d’utilisation / d’application
Grâce à cette technologie, il est possible d’effectuer des analyses précises et quantitatives, ouvrant la voie à de nombreuses applications, telles que le diagnostic précoce de maladies génétiques, la détection de pathogènes ou l’étude de l’hétérogénéité génétique des tumeurs.
La PCR digitale offre ainsi de nouvelles perspectives pour la recherche médicale et la médecine personnalisée.
Workflow de la méthode de PCR digitale
Etape 1 :
Dépôt des échantillons
Etape 2 :
Partition des ADN
Etape 3 :
Amplification des échantillons
Etape 4 :
Analyse des résultats /
Lecture des gouttelettes
(Manipulation et résultats obtenus en ½ journée)
qPCR – PCR en temps réel
Infectiologie
La PCR quantitative en temps réel, communément appelée qPCR, est une méthode avancée de biologie moléculaire qui permet la quantification relative de séquences nucléotidiques cibles.
En exploitant la cinétique de l’amplification en temps réel, la qPCR mesure l’accroissement de fluorescence spécifique à chaque cycle, reflétant directement la quantité d’ADN ou d’ARN amplifié. Cette fluorescence est généralement produite par des intercalants, ou par des sondes fluorescentes spécifiques.
Principales caractéristiques
Simple d'utilisation
Haute capacité de multiplexage
Prêt-à-l’emploi
Rapidité
Exemples d’utilisation / d’application
La qPCR est essentielle non seulement pour évaluer les variations d’expression génique, mais aussi pour la détection précise et la quantification de séquences nucléotidiques spécifiques dans divers échantillons, allant des échantillons cliniques aux échantillons environnementaux.
Études d’expression génique : permet d’identifier les gènes régulés à la hausse ou à la baisse dans différentes conditions ou tissus.
Détection de mutations : utilisée pour identifier des mutations spécifiques, telles que celles associées à des résistances aux médicaments ou à des maladies héréditaires.
Validation de données de séquençage : après des analyses de séquençage à haut débit, la qPCR peut servir à valider les variations génétiques détectées.
Quantification de pathogènes : utilisée pour détecter et quantifier des agents pathogènes, comme les virus ou les bactéries, dans des échantillons de patients.
Workflow de la méthode de PCR en temps réel
Etape 1 :
Dépôt des échantillons
Etape 2 :
Extraction de l’ADN
Partition des ADN
Etape 3 :
Configuration de la PCR
Ajout des réactifs
Etape 4 :
Amplification
des échantillons
Etape 5 :
Analyse des résultats
(Manipulation et résultats obtenus en ½ journée)
